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第三节 其他血型鉴定
一、MN血型定型
【原理】
根据红细胞膜表面是否具有M抗原和(或) N抗原,可将MN血型系统分为M型、N型和MN型3种表现型。利用红细胞凝集试验,可准确鉴定MN血型。免疫性抗M、抗N抗体能引起早产、死胎、新生儿溶血病及配血不合等。
【样本】
抗凝或不抗凝的血液标本都可以用于MN血型定型。红细胞可以悬浮于自身血清、血浆、盐水中或洗涤后悬浮于盐水中。
【试剂】
1.抗M血清。
2.抗N血清。
【操作】
1.加1滴抗M试剂到一支洁净试管,并做好标记。
2.加1滴抗N试剂到一支洁净试管,并做好标记。
3.向以上两支试管中分别加2%~5%的受检者红细胞悬液1滴。
4.轻轻混匀,置室温中5~15分钟,通常( 900~1000)×g离心15秒。
5.观察并记录反应结果。
【结果判定】
待检红细胞仅与抗M试剂凝集,与抗N不凝集,判断为MM血型;与抗M不凝集,仅与抗N试剂发生凝集,判断为NN血型;红细胞既与抗M凝集,也与抗N凝集判定为MN血型。
二、P1Pk血型定型
【原理】
当P1/P2表型被证实是由 A4GALT基因外显子2a中的一个多态性所确定后,2010年国际输血协会( ISBT)将原来的P血型系统重新命名为P1Pk血型系统,该系统包括P1Pk1和P1Pk2两种抗原(即原来的P1抗原和P k抗原)。临床上使用抗P1试剂将红细胞分成P1Pk1和P1Pk2两种抗原(抗P1阳性和抗P1阴性)。我国汉族人群P1Pk1占39.67%,P1Pk2占60.33%。
【样本】
抗凝或不抗凝的血液标本都可以用于P1Pk血型定型。红细胞可以悬浮于自身血清、血浆、盐水中或洗涤后悬浮于盐水中。
【试剂】
1.抗P1试剂。
2.已知P1Pk1和P1Pk2血型的2%~5%的红细胞悬液。
【操作】
1.加1滴抗P1分型试剂到一支洁净试管,并标记为受检者。
2.加1滴抗P1试剂到一支洁净试管,并标记为P1Pk1对照。
3.加1滴抗P1试剂到第三支洁净试管,并标记为P1Pk2对照。
4.分别向以上三支试管滴加受检者红细胞、P1Pk1和P1Pk2红细胞悬液各1滴。
5.放置室温中5~15分钟。通常( 900~1000)×g离心15秒。
6.观察凝集,并记录实验结果。
【结果判定】
P1Pk1对照管凝集,P1Pk2对照管不凝集;受检红细胞凝集者为P1Pk1表型; P1Pk1对照应管凝集,P1Pk2对照管不凝集;受检红细胞不凝集者为P1Pk2表型。
【注意事项】
1. P1Pk血型鉴定应注意控制反应时间在5~15分钟,太长容易出现假阳性。
2.抗P1常属冷凝集素IgM,4℃为最适反应温度,偶尔可引起输血反应。